elutievolgorde methylxanthines bepalen

[willl]

Voor ons practicum moesten we methylxanthines ( cafeïne, theofilline en theobromine) extraheren uit thee.

Vervolgens werd er een ionenchromatiografie op uitgevoerd, en we kregen ook standaarden. Mijn probleem is nu om de elutievolgorde te verklaren.

Op de standaarden was de elutievolgorde als volgt:

8,8' : theobromine

15,16' : theophyline

24,36' : caffeïne

ph was 6,4

mobiele fase: 0,005mol/l octylamine in milli-Q water

kolom: X-terra RP 18 (waters)

Ik weet dat de stikstoffen op de methylxanthines kunnen geprotoneerd worden, en zo ionen worden. Maar als ik de pka's bekijken en dan kijk naar de elutievolgorde lijkt de volgorde omgekeerd.

caffeïne heeft een pka van 0,60

theobromine heeft een pka van 7,89

theobromine zal dus meer geprotoneerd voorkomen dan caffeïne, en zou dus eigenlijk meest affiniteit moeten vertonen met de stationaire fase (en dus laatst elueren). Caffeïne zou dan eerst moeten elueren.

Mis ik hier ergens iets essentieels om de elutievolgorde te verklaren?

[Fuzzwood]

Heb je een apolaire of polaire kolom gebruikt? Ja, kolomtype heb je vermeld, maar je gebruikt dat niet in je redenering.

[willl]

Ik heb het net opgezocht, de groepen die er op staat zijn C18 (ketens), dus een extreem hydrofobe kolom.

Dus maakt is het idd logisch dat de minst geladen groepen (die meer hydrofoob zijn) traagst elueren. (of niet???)

ik heb alle pka's opgezocht, maar nu versta ik er weer minder van.

theobromine 0,11 3,8 13,39 16,5

theophylline; 2,6 4,4 11,5 16,0

caffeine 0,61 4,4 13,39 15,9

eerst en vooral kom ik op verschillende sites verschillende pka waarden uit.

en volgens de gegevend dat ik nu heb, zullen ze alledrie neutraal voorkomen, waarom dan ionenchromatografie?