[scheikunde] Lysisbuffer

[aSY a]

Ik heb even hulp nodig bij een opdracht voor biochemie.

Ik moet de functies beschrijven van bestanddelen van een lysisbuffer. De lysisbuffer bestaat uit:

50 mM Tris Cl (pH 8.0)

150 mM NaCl

0,02% Sodium azide

0,1% SDS

100 µg/ml Phenylmethylsulfonyl Fluoride (PMSF)

1 µg/ml Aprotinin

1% Nonidet p-40 (NP-40)

0,5% Sodium Deoxycholate

Op internet heb ik alleen de functie van SDS kunnen vinden. Dat zorgt voor de negatieve lading van eiwitten? Maar de rest kan ik niet vinden. Iemand die het wel weet? Sites of boeken zijn ook welkom.

[Gerard]

50 mM Tris Cl (pH 8.0).............. Buffer

150 mM................................... NaCl Ionsterkte

0,02% Sodium azide.................Conservering

0,1% SDS

100 µg/ml Phenylmethylsulfonyl Fluoride (PMSF)..?????

1 µg/ml Aprotinin....................... Proteaseremmer

1% Nonidet p-40 (NP-40)............Zeep Membranen/eiwitten vrijmaken

0,5% Sodium Deoxycholate........ Idem

[Roy van Heesbeen]

PMSF is ook een protease remmer.

[aSY a]

Heel erg bedankt. SDS zorgt ook voor denaturatie volgens mij. Het lost de membraan op.

[Napoleon1981]

Het denatureert eiwitten inderdaad, en helpt de hydrofobe eiwitten in de oplossing te houden. Het is een zeep en kan dus ook micellen vormen en daarmee waarschijnlijk dus ook cel membranen oplossen.