Bepaling van PAK"s m.b.v. HPLC
Doel:
Kwantitatieve bepaling van polycyclische aromatische koolwaterstoffen (PAK"s) m.b.v. HPLC.
Verwachting:
Dat het monster meer fenantreen als anthraceen bevat.
Voorbereiding:
Bestudeer:
- O. Brink, algemene instrumentenkennis, 4e druk, Wolters-Noordhoff, Groningen, 1982, § 17.9
- Dictaat Chromatografie, onderdeel HPLC
- Merck: instructie HPLC (op het netwerk of op één van de Pc"s in het instrumentenlab)
Benodigdheden:
- Vloeistofchromatograaf, voorzien van een reversed phase C 18 kolom en een Rheodyne injectiekraan, injectievolume 20 µl (zie bijlage 1 voor de beschrijving). Het bedieningsvoorschrift van de vloeistofchromatograaf is aanwezig op het instrumentele lab.
- Integrator. Het bedieningsvoorschrift van de vloeistofchromatograaf is aanwezig op het instrumentele lab.
- Eluens: methanol/water (80:20). Gebruik uitsluitend methanol en water voor chromatografie! Zowel de methanol als het water moeten worden gefiltreerd over een membraanfilter. Het eluens moet worden ontgast met helium.
Werkwijze:
Referentiemengsel (standaard):
Weeg ca. 125 mg anthraceen en 250 mg fenantreen af in een maatkolf van 500 ml. Voeg methanol (voor HPLC) toe en los op. Vul na het oplossen aan met methanol tot 500,0 ml. Verdun deze standaard 10x door de 5,0 ml te pipetteren in een maatkolf van 50 ml en aan te vullen met methanol tot 50,0 ml. Filtreer de verdunde standaard over een membraanfilter. Breng de gefiltreerde standaard over in een schone droge bruine fles van 100 ml. Vermeld op het etiket de samenstelling en de datum van aanmaak. Bewaar de standaard en de verdunde standaard in het donker.
Monster:
Vraag een monster aan bij de docent.
Analyse:
Zet de HPLC en de integrator aan volgens het bedieningsvoorschrift.
Injecteer de standaard en neem het chromatogram op,m.b.v. een integrator. Voer de bepaling minstens in duplo uit.
Herhaal dit met het monster.
N.B. Het injecteren moet snel gebeuren, anders loopt de druk te hoog op.
Verwerking:
1. Bepaal de piekoppervlakken.
2. Bereken het specifiek piekoppervlak voor iedere component.
3. Bereken de samenstelling van het monster.
H- en P zinnen:
Anthraceen:
H410: Zeer giftig voor in het water levende organismen, met langdurige gevolgen
P273: Voorkom lozing in het milieu
Fenantreen: (geen h en p zinnen)
Kan kanker veroorzaken bij langdurige blootstelling.
Methanol:
R11: Licht ontvlambaar
R23/24/25: Vergiftig bij inademing, opname door de mond en aanraking met de huid
R39/23/24/25: Vergiftig: gevaar voor ernstige, onherstelbare effecten bij inademing, aanraking met de huid en opname door de mond.
S7: In goed gesloten verpakking bewaren.
S16: verwijderd houden van ontstekingsbronnen.
S36/37: draag geschikte handschoenen en kleding
S45: In geval van ongeval of indien men zich onwel voelt, onmiddellijk een arts raadplegen en het etiket tonen.
Hierzo is het voorschrift.
Kunt u mij nu helpen?? Ik heb een deadline tot morgenmiddag 12 uur
Puzzels
ik ben al de hele tijd op internet aan het zoeken geweest maar kan echt niks vinden.
