DNA-extractie en elutie

[Valerion]

Dag allemaal

Ik ben een protocol aan het doorlezen over DNA-extractie van de firma Qiagen. Ze schrijven dat de elutie doen met 2X 100µl elutiebuffer i.p.v. 2X 200µl zorgt voor hogere concentratie aan DNA in het eluaat maar de opbrengst in wel lager.

Hoe komt dit laatste? Ik snap het niet meteen.

HB-2061-003_HB_DNY_Blood_Tissue_0720_WW

(627.2 KiB) 11999 keer gedownload

Op pagina 23 geloof ik.

Groetjes

Valerion

[Wouter_Masselink]

De elutie van DNA is afhankelijk van een evenwicht wat zich probeert in te stellen. Stel je voor dat je een pan gaat wassen me een klein beetje water, Het water zal dan heel vies worden (hoge concentratie), maar de pan kan nog steeds vies zijn. Was je de pan echter met meer water, dan zal het water lang niet zo vies zijn (lagere concentratie), en is het waarschijnlijker dat je geen viezigheid meer in de pan achter laat (hogere opbrengts.

Voor de meeste eluties gebruik ik trouwens gewoon MiliQ water, dit bevat geen EDTA en zal dus ook geen problemen geven in latere toepassingen.