Plaats een reactie

Je mail wordt niet openbaar getoond. Het wordt enkel gebruik voor contact of notificatie vanuit het beheer.

🗨️ Wat vind jij? Stel direct je vraag of geef je mening – zonder registratie. Je reactie zet het topic weer bovenaan bij 'Laatste posts' en trekt snel nieuwe reacties aan🔥. Mocht je als vaste bezoeker willen reageren, dan kun je je ook registreren.

Bevestig dat je geen robot bent door de volgende vragen te beantwoorden.

Noor heeft 10 knikkers. Ze verliest er 4 in het gras. Hoeveel heeft ze er nog?

Antwoord: (vul een getal in)

Er zitten 5 vogels op een hek. Twee vliegen weg. Hoeveel blijven er zitten?

Antwoord: (vul een getal in)

Weergave uitklappen Voorafgaande berichten: Amplificatie leidt tot kleiner fragment?

Re: Amplificatie leidt tot kleiner fragment?

door Gideon » zo 14 mei 2006, 09:32

Wanneer strak aangehouden zijn huishoudgenen inderdaad betrokken bij het onderhoud in een cel: waaronder genen voor cytoskelet eiwitten (bijv. beta-actine, tubuline).

Zo'n huishoudgen is belangrijk in quantitatieve metingen, het wordt gebruikt als normalisatie in het meten van expressiewaardes. Toch blijken veel huishoudgenen tussen verschillende celtypes en in verschillende condities wel degelijk gereguleerd te worden en wordt huishoudgen een vager begrip.

Daarom kan, zeker bij mRNA quantificatie (RT-QPCR), in principe elk transcript dienen als huishoudgen, zolang de expressie maar vrijwel constant is tussen de verschillende samples.

Re: Amplificatie leidt tot kleiner fragment?

door Roy van Heesbeen » za 13 mei 2006, 21:37

Genen die constant worden afgelezen en in alle cellen voorkomen, zoals genen voor de energiehuishouing in de cellen

Re: Amplificatie leidt tot kleiner fragment?

door rwwh » za 13 mei 2006, 17:37

[learn]Wat is een huishoudgen? Heb ik daar meer van nodig in de lente om mijn huis schoon te maken?[/learn]

Re: Amplificatie leidt tot kleiner fragment?

door Gideon » za 13 mei 2006, 17:10

Ik denk dat dit des te meer te maken heeft met het splicen van het huishoudgen, heb je hier info over? Dat je primers annealen op exon/intron boundaries lijkt me sterk, dan zou je bij je cDNA amplificatie namelijk geen product verwachten.

Amplificatie leidt tot kleiner fragment?

door kuiken » za 13 mei 2006, 11:46

Ik zoek dringend een antwoord op volgend probleem:

Ik amplificeer het genomisch DNA en het overeenkomstige cDNA van een bepaald huishoudgen met bepaalde primers. Als resultaat krijg ik een genomisch dna fragment dat kleiner! is dan mijn cdna! (Geen andere banden). Wat is hier de verklaring voor? Het heeft waarsch. iets te maken met pseudogenen en primers die op exon/intron boundaries gelegen zijn of zo, maar ik kan er geen goeie uitleg aan geven.

Enige hulp zou zéér welkom zijn!

rwwh: Bedenk de volgende keer even een duidelijke titel. Titels als "vraag" of "project" zijn zo nikszeggend.