Relatie tussen cel lijnen en kanker onderzoek (IHC)

[WilliamD]

In het ziekenhuis waar ik momenteel stage loop ga ik verschillende cel lijnen (voorbeelden: HELAp2, COLO7414, etc) kleuren met verschillende antigenen (adhv immunohistochemie) die vaak gebruikt worden in kankeronderzoek (voorbeelden: p23, MSH-2/6, MLH-1, PMS-2). Ik kan echter de relatie tussen cel lijnen en kanker onderzoeken niet trekken. Waarom is het zo van importantie om een database op te bouwen met de resultaten van deze kleruingen? Is het om resultaten te kunnen voorspellen van toekomstig kankeronderzoek? Zou iemand mij deze relatie kunnen vertellen, of mij wellicht in een richting kunnen sturen?

Alvast hartelijk bedankt.

Met vriendelijke groet,

William van Doorn

[Kravitz]

HELA en COLO zijn twee verschillende kankercellijnen. De HELA cellijn is afkomstig van baarmoederhalscellen en de COLO cellijn van colon cellen. Door die specifieke kankercellijnen te kleuren kan je achterhalen welke van je aangehaalde merkers positief zijn in dat specifieke tumorweefsel. Deze informatie kan je dan gebruiken als houvast naar de patiënt toe.

Stel nu dat je een bij een patiënt een beetje weefsel wegneemt en dat vervolgens histologisch gaat kleuren voor je verschillende merkers. Indien de resultaten daarvan overeenkomsten vertonen met de kleuring van de kankercellijn kan je ervan uitgaan dat die specifieke cellen getransformeerd zijn tot kankercellen.

Note: zo'n beslissing wordt uiteraard niet op 1 meting en liefst ook niet op 1 merker gebaseerd.

[WilliamD]

HELA en COLO zijn twee verschillende kankercellijnen. De HELA cellijn is afkomstig van baarmoederhalscellen en de COLO cellijn van colon cellen. Door die specifieke kankercellijnen te kleuren kan je achterhalen welke van je aangehaalde merkers positief zijn in dat specifieke tumorweefsel. Deze informatie kan je dan gebruiken als houvast naar de patiënt toe.

HELA en COLO zijn dus gemuteerde cellen die uiteindelijk kankercellen zijn geworden/zijn benoemd. Deze zijn dus uit mensen 'gehaald' die kanker hadden en deze zijn dus opgekweekt, als ik het goed begrijp?

Stel nu dat je een bij een patiënt een beetje weefsel wegneemt en dat vervolgens histologisch gaat kleuren voor je verschillende merkers. Indien de resultaten daarvan overeenkomsten vertonen met de kleuring van de kankercellijn kan je ervan uitgaan dat die specifieke cellen getransformeerd zijn tot kankercellen.

Note: zo'n beslissing wordt uiteraard niet op 1 meting en liefst ook niet op 1 merker gebaseerd.

Deze cellijnen zijn typisch voor het soort orgaan waar ze uit vandaan kwamen en zouden theoretisch gezien dus uit elke menselijk lichaam geïsoleerd kunnen worden?

[Kravitz]

De HELA cellijn is afkomstig van baarmoederhalskankercellen van de mevrouw Henrietta Lacks. Ze is later gestorven aan kanker en de naam van de cellijn werd naar haar vernoemd.

De cellijn is eigenlijk typisch voor het orgaan of weefsel waaruit het geïsoleerd werd. Vandaar dat het ook belangrijk is om een database op te stellen met cellijnen voor de verschillende weefsels.

Die baarmoederhalscellijn zou je in principe, op kleine genetische verschillen, uit ieder menselijk lichaam kunnen isoleren. Maar je moet ergens een standaard kiezen, hier was dat Henrietta Lacks.

Stel dat je bijvoorbeeld een patiënt hebt met een potentieel huidcarcinoom en je onderzoekt een stukje weefsel met IHC. Wil je dan die resultaten vergelijken met een IHC kleuring van weefsel uit de baarmoeder? Neen, je wil die a priori vergelijken met weefsel dat ook afkomstig is uit de huid en waarvan je weet dat het 100% tumorweefsel is.

[WilliamD]

De HELA cellijn is afkomstig van baarmoederhalskankercellen van de mevrouw Henrietta Lacks. Ze is later gestorven aan kanker en de naam van de cellijn werd naar haar vernoemd.

De cellijn is eigenlijk typisch voor het orgaan of weefsel waaruit het geïsoleerd werd. Vandaar dat het ook belangrijk is om een database op te stellen met cellijnen voor de verschillende weefsels.

Die baarmoederhalscellijn zou je in principe, op kleine genetische verschillen, uit ieder menselijk lichaam kunnen isoleren. Maar je moet ergens een standaard kiezen, hier was dat Henrietta Lacks.

Stel dat je bijvoorbeeld een patiënt hebt met een potentieel huidcarcinoom en je onderzoekt een stukje weefsel met IHC. Wil je dan die resultaten vergelijken met een IHC kleuring van weefsel uit de baarmoeder? Neen, je wil die a priori vergelijken met weefsel dat ook afkomstig is uit de huid en waarvan je weet dat het 100% tumorweefsel is.

Duidelijk, bedankt.

Wanneer men dus een onbekend preparaat Y zou krijgen uit een bepaald orgaan, en het zou qua markers overeen komen met een van de cellijnen voor dat orgaan uit de database kan met bepaalde zekerheid (afhankelijk van aantal markers) gezegd worden dat het een bepaalde gemuteerde cellijn is?

[Kravitz]

Wanneer men dus een onbekend preparaat Y zou krijgen uit een bepaald orgaan, en het zou qua markers overeen komen met een van de cellijnen voor dat orgaan uit de database kan met bepaalde zekerheid (afhankelijk van aantal markers) gezegd worden dat het een bepaalde gemuteerde cellijn is?

Bedoel je hier niet preparaat i.p.v. cellijn? Als dat het geval is, dan komt het daar inderdaad op neer!

Let wel op; het gaat niet altijd om gemuteerde cellen. B en T-cellen bijvoorbeeld (belangrijk voor ons immuunsysteem) brengen ook gedurende hun ontwikkeling verschillende merkers tot expressie. Echter, daar zijn die veranderingen in de expressie van merkers normaal, terwijl dat bij een tumorweefsel niet het geval is.

[WilliamD]

Bedoel je hier niet preparaat i.p.v. cellijn? Als dat het geval is, dan komt het daar inderdaad op neer!

Let wel op; het gaat niet altijd om gemuteerde cellen. B en T-cellen bijvoorbeeld (belangrijk voor ons immuunsysteem) brengen ook gedurende hun ontwikkeling verschillende merkers tot expressie. Echter, daar zijn die veranderingen in de expressie van merkers normaal, terwijl dat bij een tumorweefsel niet het geval is.

Je hebt gelijk, beetje te kort gezegd. Het weefsel op het preparaat bevat dus op een bepaald deel dan die gemuteerde cellijn die uit de database naar voren is gekomen. Ja, ik snap dat het niet altijd om gemuteerde cellen gaat. Maar aangeizen de vijf kleuringen (p53, MSH-2/6, MLH-1+PMS-2) in relatie staan tot gemuteerde cellen is dat bij mij wel het geval (neem ik aan?).

Bedankt voor de hulp!

[Kravitz]

Ja en neen.

p53 is een belangrijk tumorsupressorgen dat in gezonde cellen continu tot expressie wordt gebracht. Het onderdrukt in feite tumoren. Anderzijds accumuleren in tumorcellen vaak mutaties in p53 waardoor het niet meer functioneel is. Precies daarom kijk jij o.a. met die IHC kleuring of p53 nog actief is in het onderzochte staal. Indien dit niet het geval is, is er dus eigenlijk een veiligheidssysteem tegen de ontwikkeling van kanker weggevallen. Daaruit kan je dus besluiten dat er iets niet pluis is in jouw onderzochte staal.

Hetzelfde geldt voor MSH2/6, MLH-1+PMS-2, dat zijn genen die verantwoordelijk zijn voor de mismatch repair machinerie. Die zorgt ervoor dat foutjes in het DNA op een correcte manier hersteld worden. Opnieuw geldt dat in tumorcellen deze genen vaak gemuteerd worden waardoor andere 'beveiligingen' uitvallen.

Al deze merkers zijn dus gerelateerd aan normaal celonderhoud, maar echter ook aan gemuteerde cellen en kankeronderzoek.