Hemoglobine in bloed bepalen (spectrofotometrisch)

[nootmans]

Hallo, 

Ik moet voor een schoolproject de concentratie van hemoglobine in bloed bepalen. 
Dit wil ik spectrofotometrisch doen. Ik loop alleen tegen een probleem aan; 
 
Wanneer ik ijk-oplossingen ga maken en deze ga meten, wil ik deze natuurlijk uitzetten tegen de concentratie
van hemoglobine in deze oplossingen. Echter zijn deze concentraties ook niet bekend. 
Mijn docent heeft mij verteld dat ik deze wel te weten kan komen. 
Nu moest ik van hem zoeken op 'Hemoglobin Quantification' maar ik kom hier echt niet verder mee. 
 
Weet iemand wat ik hiermee moet, of heeft iemand een beter idee om het hemoglobine gehalte te bepalen?
 
 

[anusthesist]

Hier wordt een aantal methodes vrij gedetailleerd beschreven:
 
http://acutecaretesting.org/en/articles/hemoglobin-and-its-measurement
 
Helpt dit je verder?

[Wouter_Masselink]

De [Hb] equivalenten van je ijkoplossing moeten beschikbaar zijn, dan wel te bepalen. Welke methode gebruik je en wat is er bekend over je ijkoplossingen?

[BiomedLab22]

Hallo
 
Een ijklijn maak je normaal gezien uitgaande van een stock-oplossing waar de concentratie van gekend moet zijn. Het is echter ook mogelijk om de concentratie van hemoglobine te bepalen zonder een ijklijn. Dit kan door bijvoorbeeld een testkit te gebruiken. Cypress Diagnostics heeft een kit speciaal daarvoor. Dit is de haemoglobin Drabkin. Colorimetric test.
 
Het principe: Hemoglobine (Fe2+) wordt geoxideerd met kaliumferricyanide naar hemiglobine (Fe3+). Dit hemiglobine wordt die kaliumcyanide omgezet tot cyanomethemoglobine. De absorbantie van dat cyanomethemoglobine wordt dan gemeten met een fotometer en deze is propertioneel met de concentratie van het oorspronkelijk hemoglobine. Er wordt een standaard (concentratie is bekend hiervan)  meegenomen deze is ook verkrijgbaar bij cypress diagnostics.